Cara membuat BDA (kentang dextrose agar)

Video.: How to Prepare Potato Dextrose Agar (PDA) using Fresh Potatoes (Part 1/4)

Kandungan

Arahan
Menyediakan ekstrak kentang
Menyiapkan campuran
Pensterilan
Menuangkan campuran
Bagaimana
Notis
Apa yang anda perlukan

Agar kentang dextrose (BDA) adalah medium tujuan umum separa pepejal yang digunakan untuk mencipta kulat. Ia juga sering digunakan untuk mengasingkan, mengembangkan dan mengekalkan spesies cendawan dalam pembentukan. Hidangan petri yang sedia ada atau tiub yang mengandungi BDA boleh dibeli, atau BDA dapat dengan cepat dibuat menggunakan premix komersial. Walau bagaimanapun, tidak sukar untuk membuat versi yang mudah dan berkesan dengan kos yang rendah.

Arahan

Kentang (Zedcor Wholly Owned / PhotoObjects.net / Getty Images)

Menyediakan ekstrak kentang

Letakkan kentang dalam periuk dengan kira-kira 1.2 liter air paip dan reneh di atas dapur selama sejam.
Tanggalkan kuali dari panas dan dinginkan cecair sehingga ia dapat dikendalikan dengan selesa (kira-kira sepuluh minit).
Tuang ekstrak kentang cair melalui penapis atau kasa dan kumpulkan ke dalam bekas lain.

Menyiapkan campuran

Tambah dextrose dan agar hingga satu liter air ekstrak kentang.
Uji pH larutan dengan kertas penguji pH atau meter pH.
Sekiranya pH di atas 6.5, turunkannya dengan menambah satu titis penyelesaian asid hidroklorik setiap kali dan melakukan ujian lain.
Jika pH kurang daripada 6, laraskannya dengan menambah satu setitik larutan natrium hidroksida pada satu masa dan melakukan ujian baru.

Pensterilan

Campurkan dengan baik dan bahagikan kepada 250 mililiter yang lebih kecil. Tuangkan ke dalam empat botol 500 ml (setiap botol hendaklah separuh penuh supaya tidak mendidih).
Caj setiap botol dengan sekeping aluminium foil terlipat, supaya filem itu tidak jatuh, tetapi jangan membuat meterai penuh sama ada.
Letakkan balang dalam periuk tekanan.
Mengendalikan periuk tekanan mengikut arahan pengilang untuk mensterilkan BDA pada 121 ° C pada 15 psi selama 15 minit.
Matikan periuk tekanan dan biarkan ia kembali ke tekanan atmosfera, kemudian keluarkan botol dan biarkan sejuk sehingga ia dapat dikendalikan.

Menuangkan campuran

Sejajarkan hidangan petri di permukaan rata.
Apabila botol telah disejukkan ke suhu pengendalian tetapi sebelum medium mula menguatkan, tahan botol dengan satu tangan dan keluarkan penutup foil dengan tangan yang lain.
Untuk setiap hidangan petri, keluarkan tudung dengan satu tangan, cepat isi separuh dengan BDA cair dan ganti tudung.
Ulangi langkah 3 di atas sehingga semua hidangan Petri diisi.
Jika terdapat apa-apa BDA yang tersisa, dapatkan semula botol dengan penutup kertas asal, biarkan sejuk dan padat, ketatkan penutup aluminium dan simpan di dalam peti sejuk.

Bagaimana

Kebanyakan kulat berkembang dengan baik di bawah keadaan yang sedikit berasid, supaya nilai pH akhir mestilah antara 6 dan 6.5, walaupun ia boleh diselaraskan kepada mana-mana pH yang diperlukan untuk spesies tertentu.
Biarkan hidangan petri itu terbuka cukup untuk membolehkan campuran dicurahkan dan ditutup secepat mungkin.
Ia mengambil amalan untuk mendapatkan kelajuan dan kecekapan dalam tumpahan agar dalam hidangan petri.
Selepas penyejukan dan pemejalan, hidangan BDA boleh dibalut dengan plastik dan disimpan dalam peti sejuk selama berbulan-bulan.
Air paip yang paling banyak mengandungi mineral yang bermanfaat untuk pertumbuhan kulat, bagaimanapun, jika air tempatan mempunyai kepekatan mineral yang melampau atau pH yang sangat tinggi atau rendah, ganti dengan air suling.

Notis

Ikuti semua arahan operasi dan keselamatan untuk periuk tekanan untuk digunakan.
Biarkan penutup botol longgar apabila mensterilkan periuk tekanan untuk mengelakkan terlalu banyak tekanan.
Pakai sarung tangan tahan panas apabila mengendalikan bekas panas.
Pakai cermin mata keselamatan semasa mengendalikan periuk tekanan apabila mengeluarkan BDA steril dan semasa tuangkan.