Kandungan
Sebatian kimia cetyltrimethylammonium bromide, heksadecyltrimethylammonium bromide, palmityltrimethylammonium bromide dan cetrimonium bromide juga dikenali oleh CTAB. Kimia ini digunakan sebagai penyelenggara pH dalam genom jujukan DNA, terutamanya tumbuhan.
Pengilangan memecahkan dinding sel tumbuhan untuk pengekstrakan DNA (Jason Reed / Ryan McVay / Visi Digital / Getty Images)
Formula CTAB
Jumlah formula pelbagai bahan kimia CTAB berbeza bergantung kepada makmal. Walau bagaimanapun, semua bahan termasuk 1 M Tris HCl pH 8.0, 0.5 M EDTA, 5 M NaCl dan H2O (kadang-kadang dua kali suling). Untuk komponen CTAB, sesetengah makmal menggunakan cetyltrimethylammonium bromide dan lain-lain heksadecyltrimethylammonium bromide.
Penyediaan tisu sayur-sayuran
Penyediaan tisu tumbuhan mungkin berbeza-beza, bergantung kepada bahan. Membran dinding dan sel mesti rosak untuk mendapatkan akses kepada bahan nuklear tanpa sebarang kerosakan. Biasanya, dalam pengilangan, bahan tumbuhan dengan nitrogen cecair membolehkan akses kepada DNA, mengekalkan enzim sel berbahaya dan bahan kimia yang tidak aktif.
Penggantungan dan sentrifugasi
Tisu yang dihancurkan diletakkan pada bilah CTAB dan dimasukkan ke dalam mangkuk air yang mengalir. Ia kemudian dicampurkan dengan kloroform dan disentrifugasi untuk memisahkan protein larut dan bahan lain. DNA kemudian dicetuskan dari fasa berair dan dicuci dengan teliti untuk mengeluarkan garam yang mencemarkan. DNA yang dimurnikan kemudiannya ditarik dan disimpan pada slaid TE atau air suling steril.