Kandungan
PCR adalah kaedah yang digunakan oleh saintis untuk membuat berjuta-juta salinan segmen DNA. Polimerase - sejenis enzim protein - membantu menghasilkan segmen baru. Para saintis sering menggunakan polimerase Taq dalam PCR.
Sejarah
Polimerase Taq berasal dari bakteria Thermus aquaticus, yang tinggal di perairan terma. Kary Mullis dan Fred Faloona mengembangkan PCR pada pertengahan tahun 1980-an dengan menggunakan polimerase coli Escherichia, tetapi ahli sains tidak lama lagi mula menggunakan Taq dalam PCR kerana ia lebih tahan terhadap suhu tinggi.
Fungsi
PCR melibatkan langkah denaturation, penyepuhlindapan dan replikasi, biasanya diulang 20 hingga 30 kali. Denaturasi memisahkan dua helai DNA ke dalam helai terpencil. Dalam langkah penyepuh, primers mengikat segmen DNA untuk disalin. Taq polimerase mula bekerja pada langkah replikasi: polimerase dipasang, dari setiap helai DNA tunggal yang ditandai oleh primer, satu helai dua baru.
Faedah
Suhu tinggi yang diperlukan untuk menafikan DNA memusnahkan polimerase E. coli yang asalnya digunakan dalam PCR, yang memerlukan penambahan enzim tambahan pada setiap kitaran. Polimer Taq boleh menahan suhu ini, jadi saintis kini boleh melakukan pelbagai PCR kitaran secara automatik.
Pertimbangan
Taq polimerase mempunyai kadar ralat penggandaan DNA yang agak tinggi. Polimerase lain yang stabil pada suhu tinggi mempunyai kadar kesilapan yang lebih rendah, tetapi Taq masih lagi digunakan kerana kebolehpercayaan dan fleksibilitinya.